Qubit RNA IQ Assay Kit 的檢測原理主要基于熒光染料與 RNA 的特異性結合以及對熒光信號的檢測,具體如下:
染料與 RNA 特異性結合:試劑盒中的熒光染料能夠特異性地結合到 RNA 分子上。這種染料具有特殊的結構和性質,它可以插入到 RNA 的雙鏈區域或與 RNA 的特定結構域相互作用,而且結合的程度與 RNA 的量成正比。
熒光信號產生與檢測:當熒光染料結合到 RNA 上后,在特定波長的激發光照射下,染料會被激發并發出熒光。Qubit 儀器能夠精確地檢測到這種熒光信號的強度。由于熒光信號強度與結合的染料量成正比,而染料量又與 RNA 的量成正比,所以通過檢測熒光信號強度就可以準確地測定 RNA 的濃度。
RNA 質量評估:該試劑盒不僅可以檢測 RNA 濃度,還能評估 RNA 的質量。它是通過檢測不同大小 RNA 片段所產生的熒光信號分布來實現的。例如,完整的核糖體 RNA(rRNA)包括 28S rRNA 和 18S rRNA 等,它們的大小不同。在正常情況下,細胞內的 rRNA 含量相對穩定,且 28S rRNA 與 18S rRNA 的比值也較為固定。當 RNA 發生降解時,rRNA 會斷裂成較小的片段,導致 28S rRNA 與 18S rRNA 的比值發生變化,以及 RNA 完整性指數(RIN)改變。Qubit RNA IQ Assay Kit 通過分析熒光信號在不同大小片段上的分布情況,計算出 RIN 值和 28S/18S 比值等參數,從而評估 RNA 的質量和完整性。